Portugal

Zenit G-Sight

PORQUÊ AUTOMATIZAR A TÉCNICA DE IFI NO DIAGNÓSTICO DAS PATOLOGIAS AUTOIMUNES

A clarificação das suspeitas associadas aos sintomas de foro reumatológico são essencialmente conseguidas através da avaliação/detecção serológica dos anticorpos específicos de doenças (ex.: anticorpos anti-nucleares, ANAs)

Não obstante o desenvolvimento de técnicas e métodos tais como ELISA (Imunoensaio enzimático em fase sólida), o método de IFI para o screening dos testes ANA é o método gold standard no processo de diagnóstico para as desordens sistémicas do foro reumatológico tais como o Lúpus Eritematoso Sistémico (SLE), Sindroma de Sjögren (SS), Esclerose Sistémica Progressiva (PSS), Dermatomiosites – Polimiosites (DM/PM) ou Doença Mista do Tecido Conjuntivo (MCTD).

As guidelines Internacionais recomendam que o screening dos ANA deve ser realizado em linhas célulares do carcinoma do epitélio humano (HEp-2 ). Outros substratos celulares tais como Crithidia luciliae ( para a detecção de anticorpos anti dsDNA) e os neutrófilos humanos (para a detecção de anticorpos anti – citoplasma de neutrófilo, ANCA) são utilizados em rotina por metodologia IFI.

Os autoanticorpos dão origem a padrões de fluorescência característicos cuja análise depende do conhecimento e da interpretação subjectiva do investigador, existindo assim uma elevada variabilidade intra e inter laboratorial sendo este o maior problema no diagnóstico das doenças autoimunes.

O incremento de trabalho e a necessidade de standardizar e realizar uma avaliação reprodutivel dos testes baseados no método de IFI conduziram os laboratórios de autoimunidade no sentido da automatização.

O novo sistema Zenit G Sight da A. Menarini Diagnostics foi especialmente desenvolvido para ultrapassar estas questões especificas da imunofluorescência, tornando-o particularmente adequado para o diagnóstico serológico automatizado das patologias autoimunes na rotina do laboratório de autoimunidade.

 

PROCEDIMENTO DO ENSAIO DE IFI

Os principais passos do método são:

1

Diluição das amostras de soro (por ex. 1:80) e incubação no substrato fixado na lâmina por 30 min em câmara húmida à TA.

2

Incubação por 30 min a TA com conjugado de ovelha anti IgG Humana marcado com FITC (isocianato de fluoresceina)

3

Análise visual ou automática das lâminas

 

 

 

 

PADRÔES DE IFI*

A detecção de ANA em células HEp-2 gera padrões fluorescentes. Os cinco principais padrões que podem ser encontrados são:

Homogeneous / Peripheral

Nucleolar

Speckled

Centromere

Cytoplasmic / Mitochondrial

Homogeneo

Nucleolar

Mosqueado

Centrómero

Citoplasmático/Mitocondrial

* Os padrões ANA por fluorescência em células HEp-2 são aqui apresentados porque esta é a metodologia visual/automatizada mais utilizada no screening das doenças reumáticas.

Os nossos valores

4 valores que deram vida à Menarini e marcaram a sua história

DESCUBRA MAIS »